Columna HILIC Amida
Columna HILIC Amida en empaque

Columna HILIC Amida - USP L68

Fase neutra HILIC especializada para compuestos polares
Tamaño partícula: 5 μm / Poros 120 Å
Estabilidad pH 2.0 - 8.0
Compatible LC/MS, ELSD, CAD
Disponibilidad: En stock

Categoría: Columnas HPLC

La Columna HILIC Amida de Hawach es una fase estacionaria polar diseñada para retener y separar compuestos hidrofílicos que apenas se retienen en columnas C18 de fase reversa. El grupo funcional amida genera interacciones por enlace de hidrógeno y fuerzas dipolo-dipolo, ideal para carbohidratos, metabolitos polares, péptidos, glicanos y fármacos hidrofílicos.

Fabricada con sílice esférica porosa de ultra alta pureza (≥99.999 %) y grupos carbamoilos unidos químicamente. A diferencia de la sílice desnuda y la fase NH₂, la amida es eléctricamente neutra, más estable y no forma compuestos de base de Schiff con azúcares reductores. Cuenta con mayor vida útil, excelente reproducibilidad lote a lote y formas de pico simétricas. Clasificada como USP L68, constituye un reemplazo directo para Waters XBridge Amide, Thermo Accucore Amide HILIC y Agilent Zorbax HILIC Plus, compatible con detectores LC/MS, ELSD, CAD y UV.

Columnas de HPLC de amida hilicana

¿Por qué los compuestos polares no se retienen en columnas C18?

Los compuestos hidrofílicos como azúcares, aminoácidos, nucleótidos y metabolitos polares suelen presentar retención mínima en C18, eluyendo cerca del volumen muerto con baja resolución y señal débil en espectrometría de masas. La Columna HILIC Amida soluciona este inconveniente mediante:

  • Retención mediante fuertes interacciones polares
  • Fases móviles con alto contenido de disolvente orgánico
  • Selectividad ortogonal respecto a métodos de fase reversa

El resultado es mayor retención, mejor separación, sensibilidad LC/MS mejorada y mayor reproducibilidad en análisis de analitos polares.

Comparativa: HILIC Amida frente a otras fases polares

Característica HILIC Amida (USP L68) Sílice desnuda (USP L3) Amino NH₂ (USP L8)
Mecanismo de retenciónEnlace de hidrógeno + particiónInteracciones mixtas de silanolIntercambio aniónico débil
Estabilidad con azúcares reductoresExcelenteModeradaPobre
Reproducibilidad lote a loteMuy altaVariableModerada
Vida útil de la columnaLargaModeradaCorta
Compatibilidad LC/MSExcelenteBuenaModerada
Tiempo de equilibradoRápidoModeradoLento
Aplicación principalCarbohidratos, glicanos, metabolitos, péptidosHILIC generalMétodos tradicionales para azúcares

Conclusión clave: La Columna HILIC Amida ofrece el rendimiento más estable y la mejor compatibilidad con LC/MS para separaciones de compuestos polares.

Amida vs ZIC-HILIC

Fase cromatográfica Carga superficial Aplicación habitual
AmidaNeutraAzúcares, glicanos, compuestos polares neutros
ZIC-HILICZwitteriónicaMetabolitos iónicos, compuestos fosforilados
NH₂Débilmente básicaMétodos heredados de análisis de carbohidratos

Guía de selección rápida Columna HILIC Amida

Aplicación Código Cat# Partícula / DI × Longitud Motivo de elección
Control calidad rutinario compuestos polares130213955 μm, 4.6 × 250 mmResolución máxima formato estándar
Análisis más ágil130213945 μm, 4.6 × 150 mmTiempo de ejecución reducido
Análisis de alto rendimiento130213935 μm, 4.6 × 100 mmEquilibrio entre velocidad y resolución

Especificaciones técnicas Columna HILIC Amida

Clasificación USP L68
Grupo funcional unido Carbamoilo (amida)
Tamaño partícula 5 μm
Tamaño poro 120 Å
Área superficial ~320 m²/g
Carga de carbono ~7 %
Rango pH estable 2.0 - 8.0
Presión máxima operativa ~4000 psi
Temperatura máxima ≤60 °C
Fase móvil típica Acetonitrilo/agua o tampón (70–95 % ACN)
Caudal recomendado (4.6 mm DI) 1.0 mL/min
Detectores compatibles LC/MS, ELSD, CAD, RI, UV
Nota especial Sin tratamiento de sellado de extremos (end‑capping)

Información de pedidos Columna HILIC Amida

Código Cat# Descripción completa Unidades por pack
13021393Columna HPLC, HILIC Amida, 5 μm, 120 Å, 4.6 × 100 mm1
13021394Columna HPLC, HILIC Amida, 5 μm, 120 Å, 4.6 × 150 mm1
13021395Columna HPLC, HILIC Amida, 5 μm, 120 Å, 4.6 × 250 mm1

Modelo recomendado: 13021395 - HILIC Amida, 5 μm, 120 Å, 4.6 × 250 mm, formato estándar para aplicaciones HILIC rutinarias.

Aplicaciones típicas

Sector Muestras analizadas Objetivo del análisis
CarbohidratosMonosacáridos, disacáridos, oligosacáridosRetención estable sin reacción de base de Schiff
FarmacéuticaFármacos y metabolitos polaresControl calidad compatible con LC/MS
BiofarmaciaGlicopéptidos, glicanosPerfil de glicosilación
MetabolómicaAminoácidos, nucleótidosPerfil metabolito polar
AlimentaciónVitaminas, aditivos alimentariosAnálisis nutricional
Medio ambientePlaguicidas polaresSeparación ortogonal a fase reversa
Productos naturalesGlucósidos, alcaloides polaresSeparación de compuestos hidrofílicos

Mecanismo de retención HILIC Amida

La retención en modo HILIC se basa en tres interacciones principales:

  • Interacciones por enlace de hidrógeno
  • Fuerzas dipolo-dipolo
  • Partición en la capa acuosa adsorbida sobre la fase estacionaria

El uso de fases móviles con alto contenido de acetonitrilo (70-95 %) incrementa la retención y mejora la sensibilidad en espectrometría de masas.

Recomendaciones para la fase móvil

Composiciones recomendadas:

  • Proporción ≥70 % acetonitrilo
  • Tampones volátiles: acetato de amonio, formiato de amonio (para LC/MS)
  • Tampón fosfato únicamente para detección UV

Condiciones no recomendadas:

  • Contenido de agua superior al 30 %
  • Operación prolongada a pH >8
  • Funcionamiento permanente con fase móvil 100 % acuosa

Fabricación y control de calidad

  • Fabricación bajo normativa ISO 9001
  • Sustrato de sílice de ultra alta pureza (>99.999 %)
  • Proceso controlado de unión del grupo amida
  • Cada lote ensayado con mezcla de estándares polares
  • Certificado de análisis COA y cromatograma de prueba incluidos
  • Trazabilidad completa por lote
  • Disponible fabricación OEM y etiquetado privado

Compatibilidad con columnas comerciales líderes

Columna referencia Nivel de compatibilidad
Waters XBridge AmideReemplazo directo
Thermo Accucore Amide HILICRendimiento equivalente
Agilent Zorbax HILIC PlusReemplazo directo
Phenomenex Luna HILICRendimiento comparable
Métodos bajo norma USP L68Totalmente compatible

Ventajas de elegir la Columna HILIC Amida de Hawach

  • Precio competitivo respecto a marcas internacionales
  • Reemplazo directo sin necesidad de modificar métodos de QC
  • Stock estable en los SKU estándar
  • Documentación completa COA y cromatograma por lote
  • Soporte OEM y etiquetado privado
  • Envío rápido para formatos estándar (3–5 días hábiles)
  • Alta reproducibilidad lote a lote

Preguntas frecuentes sobre la Columna HILIC Amida

¿Cuál es la diferencia entre HILIC amida y C18?
La Columna HILIC Amida retiene compuestos polares mediante fases móviles ricas en acetonitrilo. La fase C18 retiene analitos apolares con sistemas mayoritariamente acuosos, ambos mecanismos son ortogonales.

¿Por qué elegir amida y no la fase NH₂?
Las fases amida son químicamente neutras, más estables, compatibles con LC/MS y no generan reacciones de base de Schiff con azúcares reductores.

¿Sirve para análisis de carbohidratos?
Sí, es una de las columnas más utilizadas para separación de mono y oligosacáridos, glicanos.

¿Clasificación USP correspondiente?
USP L68.

¿Compatible con LC/MS?
Sí, excelente rendimiento al emplear tampones volátiles.

¿Disponible fabricación OEM y dimensiones personalizadas?
Sí, atendemos pedidos con especificaciones especiales y etiquetado privado.

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